Това е вид ензим, който катализира (ускорява) реакциите, когато се извършват трансфери на фосфатни групи, по-специално хексокиназата работи върху фосфорилирането на глюкозата, за да образува ново съединение, наречено "глюкозо-6-фосфат" (тъй като фосфорната група е разположена върху въглерод номер 6 на глюкоза). В биохимичната реакция, че е необходимо действието на хексокиназа, това е процесът на гликолиза или разграждане на глюкозата, специфично в мускулите и други тъкани като мозъка, червените кръвни клетки и, наред с други, разграждането на глюкозата води до производството на пировиноградна киселина или пируват; реакцията на гликолиза в обратна посока води до образуване на глюкоза от невъглеродни съединения или глюкогенегенеза и възниква на чернодробно ниво.
След това този ензим беше наричан хексокиназа поради етимологичното значение на думата, "киназа" показва, че ензимът произвежда фосфорилиране (добавя фосфорна група към реакцията), а "хексо" се отнася до реакцията, която е Среща се в хексози, това са група въглехидрати или захари, които се състоят от 6 въглерода, в тази група са глюкоза, фруктоза, маноза и др. Едно от съществените химични съединения за правилното функциониране на хексокиназата е магнезият, който инхибира отрицателните заряди на кислород или АТФ, като по този начин улеснява комбинацията на фосфатната група с хексоза, поради което не работи без наличието на магнезий.
Хексокиназата има изоензим (те са различни, но изпълняват една и съща функция) това се нарича глюкокиназа, разликата между двете е мястото на локализация, хексокиназата се намира във всички клетъчни тъкани, които се нуждаят от глюкоза като енергиен източник, докато че глюкокиназата се намира само в хепатоцитите, това са клетки, които изграждат това, което е чернодробна тъкан(черен дроб). И двете изпълняват една и съща функция, фосфорилират глюкозата, така че тя да не избяга от клетката, задържайки я, за да извърши процеса на гликолиза, друга важна разлика между двата ензима е съединението, което инхибира неговата функция, хексокиназата спира да работи, ако е притежавана глюкозо-6-фосфат във високи концентрации, докато глюкокиназата се инхибира от големи количества фруктоза-6-фосфат.
